ANALISA KADAR PROTEIN TERLARUT DENGAN METODE LOWRY-FOLLIN

1.     Alat dan Bahan

a)    Alat :

1.      Spektrofotometer 2.      Neraca 3.      Pipet Ukur 4.      Labu Ukur 5.      Erlenmeyer 6.      Vortex

7.      Beaker Glass 8.      Pompa Vacum 9.      Corong Buchner 10.      Tabung Reaksi 11.      Kuvet

b)    Bahan :

1.      Biskuit Roma Kelapa 2.      BSA 0,3 mg/ml 3.      Reagen A 4.      Reagen B

5.      Reagen C 6.      Reagen D 7.      Reagen E 8.      Aquades

2.     Prosedur Kerja

a)    Membuat Kurva Standar BSA

1.     Menyiapkan alat dan bahan.

2.    Mengambil BSA 0- 0,2 - 0,4 - 0,6 - 0,8 - 1 ml, memasukkan tiap ukuran ke tabung reaksi.

3.    Menambahkan aquades 1 - 0,8 - 0,6 - 0,4 - 0,2 - 0 ml, memasukkan tiap ukuran ke tabung reaksi yang berisi BSA yang sesuai sehingga volumenya menjadi 1 ml.

4. Menambahkan 1 ml reagen D ke tiap tabung reaksi, memvoetex, menginkubasikan selama 15 menit pada suhu ruang.

5.     Mnambahkan 3 ml reagen E, memvortex, menginkubasikan selama 45 menit pada suhu ruang.

6.     Menera OD-nya pada panjang gelombang 750 nm (Absorbansi).

7.      Membuat kurva standar.

b)    Analisa Kadar Protein Terlarut

1.      Menyiapkan alat dan bahan.

2.      Menimbang ±0,5 gr sampel, memasukkan ke beaker glass, menambah sedikit aquades, memasukkan ke labu ukur 100 ml, menambah aquades sampai tanda tera.

3.      Mengambil 1 ml, memasukkan ke tabung reaksi, menambahkan 1 ml reagen D, memvortex, menginkubasikan selama 15 menit pada suhu ruang.

4.    Menambahkan 3 ml reagen E, memvortex, menginkubasikan selama 45 menit.

5.     Menera OD-nya pada panjang gelombang 750 nm.

6.     Menghitung kadar protein terlarut dengan rumus :

                              X= (y – a) / b

                 y = absorbansi sampel

                 a dan b = ketetapan dari kurva standar yg dibuat

    % Protein Terlarut = (X × fp × 100 %) / mgr sampel

7.      Membersihkan alat dan mengembalikan ke tempatnya.

KETERANGAN : 1.  Reagen A Lowry 100 gr Na2CO3 + NaOH 0,5 N sampai 1 liter 2. Reagen B Lowry 1 gr CuSO4 + aquades sampai 100 ml 3. Reagen C Lowry 2 gr Kalium Tartrat + aquades sampai 100 ml 4. Reagen D Lowry 15 ml Reagen A+ 0,75 ml Reagen B + 0,75 ml Reagen C 5. Reagen E Lowry 10 ml larutan Follin diencerkan sampai 100 ml